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用多樣品冷凍研磨機研磨甘蔗葉提取RNA

       甘蔗是世界上最為重要的糖料作物,而且還是最具發(fā)展?jié)摿Φ木G色能源原料。 RNA提取是植物分子生物學和基因工程研究的前提,獲得完整、純度高的基因組RNA對研究的成功十分重要。
       目前發(fā)表的關于植物RNA提取的文獻很多,但不同植物和植物自身的不同部位都有其各自的特點,很難用一種方法來提取不同植物的RNA,甘蔗基因組RNA的提取是進行甘蔗分子生物學研究的基礎,但由于甘蔗含有大量的酚和多糖等有機物質(zhì),這些物質(zhì)極大的干擾RNA的提取。
       按照常規(guī)提取植物組織總RNA的方法提取甘蔗基因組RNA常常因產(chǎn)量小和純度低而不能滿足實驗要求。
       影響甘蔗RNA提取質(zhì)量的另一個重要因素是提取材料,因為老的植物組織通常含有較多糖類及其他雜質(zhì),此外甘蔗莖在液氮中研磨困難整節(jié)硬化)和莖節(jié)1~ 3節(jié)、根易褐化,導致甘蔗莖總RNA的提取質(zhì)量差和根中提取RNA量少。所以提取甘蔗基因組總RNA的材料應盡量取用甘蔗嫩葉或把甘蔗莖榨成蔗汁團。此外,為了避免外源RNA的污染,要盡量避免操作環(huán)境人員流動帶來的污染,定期對操作環(huán)境進行滅菌處理,還要盡可能地縮短實驗過程,減少實驗步驟因。
       因甘蔗葉片纖維含量比較高,所以傳統(tǒng)的研磨方式很難研磨,且研磨過程中RNA容易降解,而冷凍研磨儀正好解決此類難題。傳統(tǒng)的方式是手工研磨,因為樣本體積小,又比較珍貴,手工研磨樣本損失比較嚴重,提出的RNA濃度非常低,所以冷凍研磨儀,樣本零損失,而且操作簡單便捷,可以批量處理,很好的解決了實驗上提取RNA的問題。
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